开发和验证基于重组的人类TNF-α的ELISA以检测和量化阿达利木

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 阿达利穆马布是治疗炎症疾病的关键生物疗法.
• 目前用于测量阿达利穆马布的方法在敏感性和评估药物动力学变异性方面存在局限性.
• 需要一个强大的内部测试来监测阿达利穆马布水平.

研究的目的:

• 开发和验证一种敏感的酶相关免疫吸收试验 (ELISA) 用于量化阿达利姆巴.
• 使用开发的测定方法评估阿达利穆马布的药理动力学变异性.
• 为建立可靠的阿达利穆马布监测的内部方法.

主要方法:

• 开发了一种使用复合人体TNF-α (rhTNF-α) 作为捕获抗体的ELISA.
• 使用表面等离子体共振 (SPR) 描述了阿达利穆马布的结合动力学.
• 在多个运行和血清矩阵中验证了试验准确性,精度,线性,特异性和稀释完整性.

主要成果:

• 该试验表明可以接受的结合动力学 (K_D = 2.38x10^-07 nM).
• 验证的线性范围为5.2 ng/ml至200 ng/ml,LLOQ为5.2 ng/ml,ULoQ为200 ng/ml.
• 该试验显示了高灵敏度,可重现性和特异性,没有与rituximab的交叉反应.

结论:

• 开发的基于 rhTNF-α 结合的 ELISA 是一种敏感,可重复和有效的方法来测量阿达利姆巴.
• 这种试验适用于监测阿达利穆马布水平,并评估个人间和个人内部的药理动力学变化.
• 经过验证的试验为涉及阿达利穆马布治疗的临床和研究应用提供了有价值的工具.