对AID/APOBEC的生物化学测定以及对AID/APOBEC抑制剂的鉴定

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分子生物学分子生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 激活诱导的cytidine deaminase (AID) 和APOBEC3 (A3) 蛋白质是cytidine deaminases,在适应性免疫和对病毒的天生的防御中发挥着关键作用.
• 通过诱导全基因组突变,AID/A3活动的失调有助于瘤发生,免疫逃避和治疗抵抗.
• 准AID/A3酶是一种有前途的治疗策略,可以抵消这些有害影响.

研究的目的:

• 讨论开发向AID/A3酶的抑制剂的策略.
• 审查用于选潜在的AID/A3抑制剂的生物化学测试.
• 为已建立的用于AID/A3活性测量的体外酶测定提供协议.

主要方法:

• 生物化学分析的审查,包括基于细胞质和体外活性和基于结合的分析.
• 讨论设计用于AID/A3.3的可靠酶试验的考虑因素.
• 基于凝的性裂变和PCR/基于测序的细节性协议,用于纯化的AID/A3活性测量.

主要成果:

• AID/A3酶可以被小分子或更大的分子向,抑制基质访问.
• 各种生物化学测试适用于选AID/A3抑制剂.
• 已经建立了用于直接测量DNA/RNA基板上的AID/A3活性的协议.

结论:

• 抑制AID/A3酶是一个可行的治疗途径.
• 强大的酶试验对于发现和开发AID/A3抑制剂至关重要.
• 标准化测试方案促进了AID/A3酶学和药物开发方面的研究.