基于串行块面电子显微镜的新方法来研究周围神经系统
Vitalijs Borisovs1,2, Mario Bossi1, Laura Matino3
1Experimental Neurology Unit, School of Medicine and Surgery, Università di Milano-Bicocca, Monza, Italy.
Journal of the peripheral nervous system : JPNS
|April 19, 2025
概括
自动无乌拉尼尔染色为外围神经和背根质 (DRG) 的连续块面扫描电子显微镜 (SBF-SEM) 提供了有竞争力的替代方案. 这种方法简化了3D超结构分析,使复杂的成像更容易获得.
科学领域:
- 电子显微镜电子显微镜
- 神经科学是一个神经科学.
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 串联块面扫描电子显微镜 (SBF-SEM) 提供高分辨率的3D成像,但在样本准备和重建方面面临挑战.
- 周围神经和背部根 (DRG) 对超结构分析具有独特的复杂性.
研究的目的:
- 评估和优化外围神经和DRG标本中SBF-SEM的样本准备技术.
- 为了比较手工黄金标准染色与自动传输电子显微镜 (TEM) 和无乌兰块制备方法.
- 评估对这些具有挑战性的组织进行自动3D重建的可行性.
主要方法:
- 测试了三种不同的SBF-SEM样品制备技术:手动高分子量染色,自动化标准TEM制备和自动化无烯块制备.
- 使用了来自小鼠尾巴神经和DRG的样本.
- 图像分析和3D染使用集成软件解决方案进行.
主要成果:
- 手动高分子量染色方法总体上显示出优异的结果.
- 自动化标准TEM和无乌兰的方法为尾部神经样本提供了高质量的图像.
- 所有测试样品的自动3D染成功.
- 无乌兰制剂显著改善了DRG标本的对比度,克服了标准TEM制剂所面临的挑战.
结论:
- 自动无乌兰染是一种可行的替代SBF-SEM传统方法,提供具有竞争力的结果,但有一些局限性.
- 使用标准的TEM制备方法,可以实现对外围神经的高质量的SBF-SEM成像,从而能够对先前嵌入的样本进行分析.
- 这些进步使神经组织的超结构分析变得更加容易.
