隔离和表征小鼠造血干细胞和原始细胞衍生的细胞外囊泡的协议
Federica Zanotti1, Ilaria Zanolla2, Massimo Bonora2
1Ruth L. and David S. Gottesman Institute for Stem Cell and Regenerative Medicine Research, Albert Einstein College of Medicine, Bronx, NY 10461, USA; Department of Cell Biology, Albert Einstein College of Medicine, Bronx, NY 10461, USA; Departments of Oncology and Medicine, Albert Einstein College of Medicine-Montefiore Health System, Bronx, NY 10461, USA.
STAR protocols
|April 19, 2025
概括
这项研究详细介绍了一种分离和特征细胞外囊泡 (EVs) 来自血造干细胞和原生细胞 (HSPCs) 的协议. 这些EV对于维持造血干细胞 (HSC) 自再生至关重要.
科学领域:
- 干细胞生物学 干细胞生物学
- 细胞外囊泡研究研究
- 血液形成 血液形成 血液形成
背景情况:
- 造血干细胞 (HSC) 具有自我更新的能力.
- 这种自我更新通过自身隐性信号来维持.
- 血造干细胞和原始细胞 (HSPC) 衍生的细胞外囊泡 (EVs) 介导这种信号传递.
研究的目的:
- 提出一个详细的协议,以将EV与HSPC隔离和表征.
- 提供一种适用于 in vivo 小鼠模型的方法.
- 为了进一步研究EV介导的HSC监管.
主要方法:
- 动物骨髓隔离 动物骨髓隔离
- 在HSPC染色和细胞分类中进行染色和分类.
- 由HSPC衍生的EV隔离和特征 (大小,度)
- 电动汽车可视化和标记分析.
主要成果:
- 建立了一个全面的协议,用于从小鼠HSPC中隔离EV.
- 描述了特征EV大小,度和标记物的方法.
- 该协议促进了在HSC维护中对电动汽车的研究.
结论:
- 提出的协议使HSPC衍生的EVs的有效隔离和表征成为可能.
- 这种方法支持对EVs在维持造血干细胞功能中的作用的研究.
- 该协议对干细胞生物学和再生医学研究有价值.
