基于反转录循环介导的同热放大 (RT-LAMP) 和CRISPR/Cas12a) 的Senecavirus A的快速分子检测
Chenghui Jiang1,2, Huibao Wang3, Rongxia Guo1
1College of Veterinary Medicine, Gansu Agricultural University, Lanzhou, Gansu, China.
Frontiers in bioengineering and biotechnology
|April 21, 2025
概括
新的诊断工具能够准确地检测Senecavirus A (SVA),这是一种引起猪病的病原体. 这些快速的视觉测试对于控制SVA疫情和保护全球猪业至关重要.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 猪的传染病 猪的传染病
背景情况:
- 塞内卡病毒A (SVA) 导致猪异常发病囊泡性疾病 (PIVD),导致猪业的重大经济损失.
- 目前对SVA的诊断方法有限,并且没有有效的治疗方法或疫苗,这凸显了快速检测的必要性.
- PIVD与囊泡性疾病和新生猪的高死亡率有关,构成严重的全球威胁.
研究的目的:
- 开发针对塞内卡病毒A (SVA) 的快速,可靠和便携式视觉诊断试验.
- 将反转录循环介导的同热放大 (RT-LAMP) 与CRISPR/Cas12a技术相结合,用于增强检测.
- 为猪群中SVA的早期检测和监测提供有效的工具.
主要方法:
- 开发了两个视觉测试:RT-LAMP-Cas12a-FQ和RT-LAMP-Cas12a-FB,使用记者分子.
- 采用了CRISPR/Cas12a技术,用于特定和敏感地检测SVARNA.
- 使用合成标和现场样本验证了测试,并将结果与定量RT-PCR (RT-qPCR) 进行比较.
主要成果:
- 两种开发的测定方法在40-45分钟内实现了9.6副本/μL的检测极限.
- 试验显示高特异性,没有与相关的病毒核酸交叉反应.
- 在69个猪样本中检测SVA的性能与RT-qPCR可比,表明准确度令人满意.
结论:
- RT-LAMP-Cas12a-FQ和RT-LAMP-Cas12a-FB测定对SVA的早期检测非常有希望.
- 这些视觉测试为例行SVA监测提供了可行的解决方案,特别是在资源有限的环境中.
- 开发的方法有助于改善全球猪业中SVA的控制和预防策略.
