使用质谱仪对生物转换的直接分析-DiBT-MS
Ruth Knox1, Rachel Smith1, Emily E Kempa1,2
1Michael Barber Centre for Collaborative Mass Spectrometry, Department of Chemistry, Manchester Institute of Biotechnology, University of Manchester, Manchester, UK.
工程酶的高通量选是使用环境电离质谱加速的. 这种直接生物转化质谱法 (DiBT-MS) 方法可以快速高效地分析原始细胞溶解物.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
- 酵素工程是什么意思 酵素工程
背景情况:
- 高通量选对于开发工程酶和评估生物转化至关重要.
- 环境电离技术,如脱电喷电离 (DESI),提供最小的样本准备用于快速分析.
- 质谱 (MS) 提供准确的质量和并联MS (MS/MS) 用于产品识别.
研究的目的:
- 为在常规生物技术和化学生物学实验室中应用DESI-MS提出一个协议.
- 为了快速分析工程酶,包括 imine 减少酶和碳酸减少酶.
- 引入一个用户友好的工作流程,以使用MS成像来可视化反应监测.
主要方法:
- 脱电喷电离 (DESI) 与高分辨率质谱相结合.
- 从原始细胞溶解酸 (DiBT-MS) 直接分析生物转化.
- 使用MS成像来可视化基质和产品离子.
主要成果:
- 该DiBT-MS方法比液体染色学-MS快10-1000倍.
- 一个96个样本的程序在大约2小时内完成,消耗更少的溶剂和样品.
- 溶剂喷雾成分,尼龙膜幻灯片和幻灯片可重复使用性对电离效率的影响.
结论:
- DESI-MS提供了一种快速有效的方法,用于工程酶的高通量选.
- 该DiBT-MS协议简化了从原始细胞溶解体的生物转化分析.
- 这种方法显著加速了生物技术和化学生物学中的酶开发和表征.
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