将亲和染色学集成到腺病毒净化平台过程中

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 生物制药制造业 生物制药制造业
• 病毒载体技术 病毒载体技术

背景情况:

• 腺病毒载体 (AdVs) 对基因疗法,癌症治疗和疫苗开发至关重要.
• 目前的AdV净化方法,主要是离子交换色谱,在实现最佳产量和纯度方面面临挑战.
• 越来越需要先进的AdV制造平台来满足日益增长的需求.

研究的目的:

• 为腺病毒载体 (AdVs) 开发和验证一种基于亲和力的新型净化过程.
• 与现有的染色学方法相比,提高产品产量和纯度.
• 为了确保宿主细胞蛋白质 (HCP) 和宿主细胞DNA (hcDNA) 的有效清除.

主要方法:

• 使用联体 (AEFFIWNA和TNDGPDYSSPLTGSG) 针对AdV六子蛋白的亲和性染色体的开发.
• 对功能化吸附剂的不同树脂矩阵 (聚甲基甲酸盐和糖) 的评估.
• 优化洗步骤以改善杂质的去除.
• 组装一个多步骤的净化过程,包括澄清,亲和度捕获和混合模式抛光.

主要成果:

• 在温和的化条件下,亲和力过程实现了高容量 (>>5·10^{10 vp/mL) 和产量 (~50%).}
• 精选的功能化树脂显示了HCPs (144倍) 和hcDNA (56倍) 的显著清除.
• 优化过程产生了约50%的传染性单位 (IFU),其残留HCP和hcDNA水平符合临床标准.

结论:

• 开发的基于亲和力的净化工艺为AdV制造提供了重大进步.
• 这种方法提供了高产量和纯度,有效地去除关键杂质.
• 该过程是稳健的,可扩展的,并且符合AdVs临床应用的严格要求.