使用基于NGS的人类Fab Phage显示平台发现针对特有冠状病毒的抗体
Oscar Chi-Chien Pan1, Sean Miller2, Ruchin Patel1
1Infectious Disease and Vaccines, Merck & Co., Inc., Rahway, NJ 07065, USA.
Antibodies (Basel, Switzerland)
|April 23, 2025
概括
一个新的长期阅读的下一代测序 (NGS) 工作流程有效地发现了针对特有冠状病毒的强效抗体. 这种方法显著提高了效率,并为疫苗开发确定了高度特异的单克隆抗体 (mAbs).
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 病毒学 病毒学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 对于针对特有冠状病毒的疫苗,存在着尚未满足的需求.
- 抗原特异性单克隆抗体 (mAbs) 对于疫苗开发试验至关重要.
- 四种特有冠状病毒 (OC43,NL63,229E,HKU1) 构成了公共卫生挑战.
研究的目的:
- 为了确定针对四种特有冠状病毒的尖端蛋白特异性的抗体.
- 建立和验证长期阅读的下一代测序 (NGS) 工作流程,用于抗体发现.
- 将NGS工作流程的效率与传统的桑格测序方法进行比较.
主要方法:
- 使用了HuCal Fab的菌体显示库 (4.5 × 10^10的多样性).
- 开发并实施了长期阅读的NGS工作流程,用于抗体发现.
- 将NGS结果与传统的桑格测序工作流程进行比较.
主要成果:
- 在NGS工作流程中,比桑格测序识别更多的抗原特异性抗体.
- NGS的工作流程效率高达传统工作流程的三倍.
- 94.7%的NGS衍生的mAbs显示强大的结合亲和力 (EC50 <1nM);54%具有极强的亲和力 (EC50 <0.1nM).
结论:
- 成功开发并整合了长期阅读的NGS抗体生成工作流.
- NGS工作流确定了具有亚纳米分子亲和度的特定向抗体,这通常是传统方法错过的.
- 鉴定出强烈的中和抗体,表明对特有人类冠状病毒 (HCoV) 的保护潜力.
