一种通用的大麻素CB1和CB2受体TR-FRET动力联结试验

科学领域:

• 药理学 药理学是指药理学的学科.
• 生物化学 生物化学
• 药物发现 药物发现 药物发现

背景情况:

• G蛋白结合受体 (GPCRs) 是关键的药物标,了解带结合动力学是优化关键.
• 传统的放射性对象测试是耗时的,限制了它们在早期药物发现中的使用.
• 基于光的测试提供了诸如更高的吞吐量和连续数据收集等优势.

研究的目的:

• 开发一种基于光的新型结合试验,用于研究人类大麻素类型1 (CB1R) 和类型2 (CB2R) 受体的联体结合动力学.
• 为了使在生理温度下与CB1R和CB2R的联结体相互作用的连续,高通量动力分析.

主要方法:

• 合成D77,一种由Δ8-THC衍生的新型光追踪剂.
• 使用D77.7. 开发一个时间解析的Förster共振能量转移 (TR-FRET) 试验.
• 使用截断的CB1R (CB1R_91-472) 和全长的CB2R (CB2R_1-360) 结构.
• 应用了Motulsky-Mahan竞争约束模型进行动力分析.

主要成果:

• D77标志物对CB1R和CB2R都显示了纳米分子亲和力,显示了竞争性结合.
• D77表现出快速解离动力学,使得能够准确地确定快速解离联体的开启和关闭率.
• 在生理条件下测量了各种CB1R和CB2R激活剂和对抗剂的动力结合特性 (k_on,k_off).

结论:

• 对CB1R的配体亲和力主要取决于关联率 (k_on).
• 关联率 (k_on) 和解离率 (k_off) 都影响了对CB2R的联体亲和力.
• 使用这种试验对大麻素候选药物的动力分析可以显著帮助针对CB1R和CB2R的药物开发计划.