捕获离子流动的力量用于同位素追踪器实验
Karin Preindl1, Chuqiao Chen2, Supriya Murthy2
1Joint Metabolome Facility, University and Medical University of Vienna, Währinger Gürtel 18-20, 1090, Vienna, Austria; Department of Laboratory Medicine, Medical University of Vienna, Währinger Gürtel 18-20, 1090, Vienna, Austria.
捕获离子移动性光谱法 (TIMS) 增强了质谱法,通过分离异构体来准确地追踪代谢同位素. 这种方法改善了细胞代谢学中的同位素测量,这对于了解免疫学和癌症研究中的途径至关重要.
科学领域:
- 代谢学 代谢学 代谢学
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 在代谢学中,同位素追踪面临来自异构体和碎片的挑战,影响同位素对比的准确性.
- 高选择性和灵敏性对于复杂的生物样本中可靠的测量至关重要.
- 捕获的离子移动性光谱法 (TIMS) 将离子移动性分离维度添加到质谱法中,用于异构体的分化.
研究的目的:
- 评估TIMS与质谱学相结合的潜力,以在代谢追踪实验中进行准确的同位素学评估.
- 为了验证TIMS-TOF-MS的性能与已建立的基于轨道轨道的平台进行验证,以获得光谱准确性,精度和代谢物检测.
- 证明TIMS在分析哺乳动物细胞中代谢通路活性中的应用.
主要方法:
- 使用水友互动色谱与TIMS-TOF-MS (飞行时间质谱) 相结合.
- 使用基于轨道轨道的质谱仪平台进行独立验证测量.
- 在休息和激活的巨细胞中进行了概念验证同位素追踪器研究.
主要成果:
- TIMS-TOF-MS实现了卓越的精度 (0.36.4% CV) 和最小的真实性偏差.
- 通过使用离子流动性,成功分化了共释放异构体果糖-6-酸盐 (F6P) 和葡萄糖-1-酸盐 (G1P).
- 同位素分布与轨道飞行平台有很好的一致性;在激活的巨细胞中证实了糖解和酸通路 (PPP) 的激活.
结论:
- 蒂姆斯能够为G1P和F6P等关键代谢物产生明显的同位素模式.
- 由于F6P在糖解和PPP中的作用,精确的分析测量是至关重要的.
- TIMS是一种强大的技术,用于在代谢追踪中可靠的同位素分布分析,特别是用于免疫学和癌症研究.
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