从血清样本中对癌症相关蛋白质糖解酶的基于NMR的快速评估
Lorena Rudolph1,2, Renia Krellmann1, Darko Castven3
1Institute of Chemistry and Metabolomics, University of Lübeck, Ratzeburger Allee 160, Lübeck 23562, Germany.
Analytical chemistry
|April 25, 2025
概括
核磁共振 (NMR) 光谱现在可以在血清和血中检测到更多的N-甘氨酸信号. 这种先进的方法增强了用于疾病生物标志物发现的糖蛋白分析.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 医学诊断 医学诊断 医学诊断
背景情况:
- 血清和血的核磁共振 (NMR) 光谱含有来自急性阶段蛋白质上的代谢物,脂蛋白和N-甘氨酸的信号.
- N-甘氨酸信号,称为甘氨酸蛋白A (GlycA) 和甘氨酸蛋白B (GlycB),是炎症和心血管疾病的拟议生物标志物.
- 像JEDI-NMR这样的现有方法仅限于检测N-glycans的乙信号,缺少pyranose环质子的关键信息.
研究的目的:
- 开发一种改进的NMR方法,用于在血清和血中进行全面的N-甘氨酸分析.
- 增强各种N-甘氨酸结构的检测,包括化,银河化,N-乙烯基葡萄糖化和化.
- 为了能够快速和可靠地检测糖蛋白生物标记物,而无需进行酶性预处理.
主要方法:
- 在NMR光谱学中利用了选择性频率激发与标量合过相结合.
- 将该方法应用于血清和血样本,包括分离的葡萄糖蛋白和患者样本.
- 与已建立的UHPLC-MS分析相比较的NMR糖化概况.
主要成果:
- 显著增加了NMR光谱中可观察到的N-甘氨酸信号的数量.
- 启用了选择性检测N-甘氨酸的化,银河化,N-乙糖胺化,化和分支复杂性的N-甘氨酸.
- 成功观察到化和非化易斯抗原,包括易斯a (CA19-9),已知的癌症生物标志物.
- 在NMR甘化概况和UHPLC-MS分析中,对于分离的葡萄糖蛋白之间表现出了很好的一致性.
- 用来自肝细胞癌患者的样本展示了该方法的稳定性.
结论:
- 开发的NMR技术大大提高了N-甘氨酸在血清和血中的信号检测.
- 这便于为生物标志物发现提供详细的糖化化概况,包括与癌症相关的抗原.
- 该方法为临床环境中的糖蛋白分析提供了一种快速,稳健和无酶的方法.
