在Pichia pastoris中复合型XII原体的表达,优化和生物活性分析
Qiao Gao1, Zhuo Zhang2, Rongzhan Fu1
1Engineering Research Center of Western Resource Innovation Medicine Green Manufacturing, Ministry of Education, School of Chemical Engineering, Northwest University, Xi'an 710069, China; Shaanxi R&D Center of Biomaterials and Fermentation Engineering, School of Chemical Engineering and Biotech. & Biomed. Research Institute, Northwest University, Xi'an 710069, China; Xi'an Synthetic Biology Technology and Biomaterials International Science and Technology Cooperation Base, School of Chemical Engineering, Northwest University, Xi'an 710127, China.
研究人员设计了一种具有高产量的新型重组人体原XII (rh12C). 这项研究调查了外源性原XII给药对细胞外基质调节的潜在生物效应.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 原体XII (COL12A1) 是一种关键的纤维相关原体,具有中断的三环螺旋 (FACIT),参与细胞外矩阵 (ECM) 组织.
- COL12A1调节原纤维直径,并作为ECM组件之间的分子桥梁.
- 外源原XII对生物系统的直接调节影响仍然在很大程度上未被描述.
研究的目的:
- 开发一种生产高产量和纯度的重组人体原XII (rh12C) 的方法.
- 为了描述产生的rh12C的结构.
- 通过实验室基于细胞的测定来评估rh12C的潜在生物疗效.
主要方法:
- 基因工程被用来构建一个Pichia pastoris宿主细胞菌株用于rh12C生产.
- 用原的细胞内翻译调节机制来优化表达.
- 对重组蛋白质应用了净化和结构特征技术.
- 为了评估生物活性,进行了体外细胞实验.
主要成果:
- 使用工程Pichia pastoris系统,获得了4.89g/L的rh12C的最大产量.
- 再组合蛋白被成功净化并进行结构特征.
- 在体外初步研究表明,rh12C的潜在生物疗效.
结论:
- 该研究成功地通过Pichia pastoris表达系统产生了高产量重组人体原XII (rh12C).
- 开发的重组原XII具有结构特征,并显示出生物应用的潜力.
- 进一步的体外和体内研究是有必要的,以充分阐明外部原XII的调节功能.
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