新型单链片段可变抗体向猪Y染色体载精子上的血表位
Marninphan Thongkham1, Surat Hongsibsong2, Supamit Mekchay1
1Livestock Innovative and Biocirculation Laboratory, Department of Animal and Aquatic Sciences, Faculty of Agriculture, Chiang Mai University, Chiang Mai, 50200, Thailand.
Scientific reports
|May 2, 2025
概括
研究人员开发了一种新的单链片段变量 (scFv) 抗体,针对猪Y染色体携带精子 (Y精子). 这种scFv抗体对Y精子具有很高的特异性和亲和力,使其在精子分类中具有潜在的应用.
科学领域:
- 免疫技术是一种免疫技术.
- 生殖生物学 生殖生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 开发针对精子性别分类的特定抗体对于高效的畜牧养殖至关重要.
- 猪Y染色体携带精子 (Y精子) 具有独特的表面表位,可以向抗体开发.
- 与传统单克隆抗体 (mAbs) 相比,单链断片变量 (scFv) 抗体在特异性和生产方面具有优势.
研究的目的:
- 构建和产生单链断片变量 (scFv) 抗体,向猪Y-精子上的血表位.
- 评估开发的scFv抗体的特异性,亲和力和交叉反应性.
- 评估scFv抗体在猪精中的Y和X精子分类方面的潜力.
主要方法:
- 从4D1-E8生成一个杂交瘤以获得特异性.
- 在大肠杆菌BL21 (DE3) 中使用pET22b载体进行scFv基因 (VH和VL) 的克隆和表达.
- 使用ELISA,流细胞计和免疫光学对scFv抗体 (H4:L4克隆) 的表征.
主要成果:
- 一个高度特异的scFv抗体 (H4:L4克隆) 针对猪Y-精子成功产生.
- 与4D1-E8 mAb (15.5%) 相比,H4:L4 scFv抗体与X精子 (4.14%) 的交叉反应性较低.
- 免疫光检测证实了scFv抗体与Y-精子的血膜强烈结合.
结论:
- 对猪Y精子产生新型scFv抗体的成功生产代表了重大进展.
- 开发的scFv抗体对Y精子具有很高的亲和力和特异性,交叉反应性降低.
- 这种scFv抗体有望用于对Y和X精子进行分类,以改善猪生殖技术.
