四倍氨基基基编辑的全基CAR T细胞的表现优于CRISPR/Cas9核酶工程T细胞

科学领域:

• * 免疫学和基因治疗
• * 分子生物学和基因组编辑

背景情况:

• * 全基因细胞疗法依靠基因组编辑进行临床开发.
• * 在T细胞制造中进行多重编辑的最佳基因编辑方法尚未确定.

研究的目的:

• * 为了比较CRISPR/Cas9核酶和腺基编辑器 (ABE) 在异性CAR T细胞生成中的多重基因编辑.
• * 评估编辑效率,制造产量,安全概况和功能结果在体外和体内.

主要方法:

• *CRISPR/Cas9和ABE在T细胞中编辑四个基因 (TRAC/CD3E,B2M,CIITA,PVR) 的比较.
• *体外功能测定,转录基因分析和转移酶可访问的染色体测序测试.
• * 在临床前白血病模型中的体内疗效评估.

主要成果:

• *ABE和Cas9都实现了高编辑效率;ABE产生了更高的制造产量,并且具有明显的,更安全的目标外配置 (没有转移).
• * ABE编辑的CAR T细胞在体外表现出优异的效应因子功能,增殖和CAR表达,DNA损伤反应激活减少.
• *与Cas9编辑细胞相比,ABE编辑的CAR T细胞在体内表现出更好的瘤控制和生存率.

结论:

• * 腺基编辑是一种优于CRISPR/Cas9核酶的方法,用于治疗T细胞制造中的多重基因编辑.
• *ABE在产量,安全性,功能增强和体内疗效方面具有优势,用于全源CAR T细胞疗法.