基于光学显微镜的纳米尺度的基于图像的3D主动样本稳定
Jakob Vorlaufer1, Nikolai Semenov1, Caroline Kreuzinger1
1Institute of Science and Technology Austria (ISTA), Klosterneuburg, Austria.
Biophysical reports
|May 7, 2025
概括
活性漂移校正稳定三维 (3D) 的样本到超分辨率显微镜的1nm. 这种简单的方法增强了用于先进成像技术的数据收集.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 光学显微镜的使用方法
- 纳米技术纳米技术
背景情况:
- 超分辨率显微镜需要很长的采集时间,因此容易受到样本漂移的影响.
- 虽然横向漂移可以在获取后进行纠正,但在获取期间进行3D漂移纠正具有挑战性,但对数据质量至关重要.
- 现有的3D主动稳定方案可能是复杂和苛刻的.
研究的目的:
- 为纳米尺度3D样本稳定提供简单的活性漂移校正方案.
- 为了实现与最先进的超高分辨率显微镜相容的高精度3D稳定.
- 为增强成像数据收集提供可访问的解决方案.
主要方法:
- 开发了一种精细的算法,用于积极纠正漂移,可适应各种参考结构.
- 集成了一个简单的广场成像路径用于3D稳定.
- 使用开源控制软件,并使用图形用户界面来实现.
主要成果:
- 使用高和低数值光圈目标镜头实现了~1nm的3D样本位置稳定性.
- 通过多样化的参考结构证明了该方案的有效性,不需要稀疏的信号峰值.
- 验证了系统在增强单分子局部化显微镜和冷聚焦成像数据收集方面的性能.
结论:
- 提出的活跃漂移校正方案提供纳米尺度的3D稳定性,并提高了实施的简单性.
- 这项技术增强了对要求高超分辨率和衍射限制成像技术的数据采集.
- 开源软件有助于广泛采用和高分辨率显微镜的进步.
