快速的芯片上核酸提取用于治疗点的唾液诊断
Siril Arockiam1, Vi T Nguyen2, Mark Knappenberger1
1Center for Personalized Diagnostics, Biodesign Institute, Arizona State University, Tempe, AZ 85287, USA, PO Box 876401. Karen.Anderson.1@asu.edu.
概括
这项研究介绍了POC-Pure,这是一种用于从唾液中快速在芯片上提取核酸的新方法. 这通过有效净化DNA和RNA以供下游应用,简化了护理点诊断.
科学领域:
- 分子诊断学 分子诊断学
- 生物技术是生物技术.
- 关心点的技术 关心点的技术
背景情况:
- 传统的核酸提取是复杂的,不适合于 point-of-care (POC) 的设置.
- 在POC中从唾液中有效地提取RNA是由于降解而具有挑战性的.
- 现有的方法需要费力,昂贵的实验室程序.
研究的目的:
- 开发一种简化,成本效益高的芯片上核酸提取唾液的方法.
- 为了优化RNase无活化,病毒溶解,核酸结合和化条件.
- 为了证明该方法与下游分子诊断应用的兼容性.
主要方法:
- 定制缓冲器 (POC-Pure) 的配方,用于基于二氧化的核酸结合和化.
- 微流体芯片的制造使用 xurography 和激光切割用三向.
- 优化RNase无活化,病毒溶解和核酸结合/脱离条件.
- 评估还原剂,杂热盐,热量,蛋白酶K和化缓冲剂.
- 使用循环介导同热放大 (LAMP) 评估下游应用程序的兼容性.
主要成果:
- 该POC-Pure方法有效地净化和缩唾液中的DNA和RNA.
- 实现了低检测极限:DNA低于0.25副本/μL,RNA低于0.5副本/μL,输入200μL.
- 证明成功的芯片上核酸提取和净化.
- 验证下游应用程序与POC适合LAMP的兼容性.
结论:
- 开发并演示了一种简化的芯片上核酸从唾液中提取的方法.
- "POC-Pure"提供了一个具有成本效益和高效的解决方案,用于治疗点的分子诊断.
- 该方法解决了用于POC应用的基于唾液的核酸净化中的关键挑战.
