基于免疫 afinity 提取和同位素稀释-液体色谱学-双重质谱学的血清中人类胰岛素量化的候选参考测量程序

科学领域:

• 临床化学 临床化学
• 分析化学 分析化学
• 质谱测量质量谱测量

背景情况:

• 准确的人类胰岛素测量对于糖尿病管理至关重要.
• 对胰岛素的临床免疫检测显示出因抗体交叉反应性而导致的不一致性.
• 为了可靠的临床测试,需要标准化的参考测量程序 (RMP).

研究的目的:

• 开发和验证一种同位素稀释-液体色谱-并联质谱法 (ID-LC-MS/MS) 方法,作为血清中人类胰岛素量化的候选参考测量程序 (cRMP).
• 为了解决当前免疫测试的局限性,并提高计量学可追溯性.

主要方法:

• 人类胰岛素通过使用抗体固定磁珠从血清中丰富.
• 使用ID-LC-MS/MS进行了量化.
• 验证包括测量范围的评估,矩阵效应,转移,LOD,LOQ,不精确性,恢复和胰岛素类型的干扰.

主要成果:

• 用ID-LC-MS/MS方法证明了0.05-40 ng/g的测量范围,没有矩阵效应或转移.
• 检测极限 (LOD) 为24.6 pg/g,量化极限 (LOQ) 为48.8 pg/g.
• 不准确率为<2.77%,恢复率从99.5%到101.7%不等,扩展测量不确定性为≤3.5%.

结论:

• 开发的ID-LC-MS/MS方法作为可靠的cRMP,用于精确测量血清中的人体胰岛素.
• 与现有的免疫试验相比,这种方法提供了更好的准确性和标准化.
• 需要进一步讨论关于与CRMP校准候选参考材料的差异.