肝酶I治疗以克服在肝化肝脏供体样本中的RNA量化干扰:一个尺寸适合所有吗?

科学领域:

• 移植科学 移植科学
• 分子生物学分子生物学
• 生物标志物发现发现

背景情况:

• 微RNA是移植肝脏损伤的有希望的生物标志物.
• 在器官捐献中使用的氨酸可以抑制RT-qPCR测量.
• 建议肝酶I可以抵消肝素抑制,但其在肝移植环境中的有效性尚不清楚.

研究的目的:

• 通过RT-qPCR评估氨酶I对微RNA (miRNA) 检测水平的影响.
• 为了评估miRNA量化产出在肝脏活检, perfusate,和血清样本从器官捐赠者.
• 为了研究不同度的肝酶I对miRNA检测的影响.

主要方法:

• 对已故器官捐献者的肝脏活检, perfusate 和血清 (DBD 和 DCD) 的前性研究.
• 分析与肝损伤相关的miRNAs (miR-122,miR-148a) 随着和没有肝酶I治疗 (6 IU或12 IU).
• 在接受心肺旁路术的患者的肝素化血清样本中进行验证.

主要成果:

• miR-122和miR-148a在活检, perfusates 和血清中表达更高,在捐赠群体之间没有显著差异.
• 肝酶I治疗没有改善PCR结果,并且以剂量依赖的方式对miRNA检测产量产生了负面影响.
• 在DCD血清中,肝酶I显著降低了miR-122和miR-148a的表达,并增加了丢失值.

结论:

• 对肝素化样品进行肝素酶I处理的必要性需要进行个别评估.
• 肝素抑制在miRNA之间有所不同,而肝素酶I治疗可能会导致RNA降解,导致结果偏差.
• 在肝移植研究中可靠的miRNA量化需要仔细评估肝酶I的使用.