对3D癌症异球体培养和免疫治疗查测试的测试开发的新方法

科学领域:

• 生物医学工程 生物医学工程
• 癌症生物学 癌症生物学
• 免疫治疗是一种免疫疗法.

背景情况:

• 与2D培养相比,3D异球体对药物查和免疫治疗具有更高的生理相关性.
• 培养,分离和分析的局限性阻碍了异球体的更广泛应用.
• 优化这些模型对于推动癌症研究和治疗开发至关重要.

研究的目的:

• 为了优化3D癌症异球体的培养,解离和分析.
• 评估不同培养介质 (DMEM,RPMI,人体等离子体介质) 对异球体特征的影响.
• 开发和验证一种用于测量异球体内免疫媒介癌细胞杀死的新型试验.

主要方法:

• 在不同培养介质中对细胞活力,死核形成和细胞空间组织进行比较分析.
• 评估各种解离试剂 (TrypLETM,AccutaseTM,原酶I) 对它们对细胞产量和标记物完整性的影响.
• 开发一种基于 luciferase 的测定方法,用于量化完整的异球体中免疫介导的癌细胞杀死.

主要成果:

• 与DMEM和RPMI相比,Human Plasma-Like介质在HT-29异球体中显著降低了细胞活力,增加了死核形成.
• TrypLETM损害了免疫细胞活力和表面标记物检测;AccutaseTM减少了细胞产量;原酶I影响了癌细胞标记物.
• 开发的化酶试验准确地测量了免疫介导的杀死,而不需要球状溶解或解离.

结论:

• 培养基的选择对异球体的特征产生了关键的影响,包括细胞活力,亡和空间布局.
• 必须仔细选择分离方法,以平衡细胞产量,活力和标记物的完整性,以便进行准确的下游分析.
• 根据特定瘤特征量身定制实验条件,提高了3D异球体在药物发现和免疫治疗研究中的实用性.