冷对线粒体生物能和蛋白质表达在人类介质细胞 stromal 细胞的影响

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.
• 再生医学是一种再生医学.

背景情况:

• 开发用于细胞疗法的准备就绪格式,如人类介质细胞 (MSCs),对于在急性创伤和远程环境中的应用至关重要.
• 细胞活力,通过腺三酸盐 (ATP) 含量来表示,在储存期间的整体细胞活力之前会下降.
• 这项研究调查了冷藏对MSC线粒体生物能学和蛋白质表达的影响.

研究的目的:

• 评估冷藏在4°C对MSCs的影响.
• 为了比较PlasmaLyte A和无异体介质 (XFM) 在保持MSC活力和线粒体功能方面的疗效.
• 确定冷藏期间发生的关键分子变化,特别是线粒体蛋白质.

主要方法:

• MSCs在4°C的温度下存储在PlasmaLyte A或XFM中.
• 细胞被分析了21天的细胞数量,活力,ATP含量,线粒体生物能学 (海马XF24,Oroboros) 和线粒体膜潜力 (JC1染色).
• 线粒体蛋白质水平,包括那些参与融合,裂变,调节,线粒体和电子运输链功能的蛋白质水平,通过Western blot进行了评估.

主要成果:

• 虽然细胞数量相似,但XFM中的MSC与PlasmaLyte A by Day 4相比保持了显著更高的活力和ATP水平.
• 线粒体膜潜能在XFM中保存时间较长,在PlasmaLyte A.第7天观察到显著的脱极化.
• 西部斑点分析显示线粒体融合,裂变和线粒体细胞分裂蛋白质发生了显著变化,改变的DRP1S637酸化与ATP水平有很强的相关性;电子运输链蛋白质保持稳定.

结论:

• 在4°C的冷储显著影响MSC活力,线粒体膜极化和裂变动态.
• 与冷藏期间的PlasmaLyte A相比,Xeno-free medium (XFM) 显示了MSC线粒体功能和活力的优越保存.
• 对介质添加剂或治疗方法的进一步研究可以增强冷藏协议,扩大基于细胞的产品的治疗可行性.