在Pichia pastoris中通过多层次系统优化的多层次系统优化,对复合型III类人类类原α1的高水平分泌表达
Jing Wang1, Zhi-Xiang Xiang2, Meng-Fan Luan2
1Key Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Biotechnology, Ministry of Education, School of Life Sciences and Health Engineering, Jiangnan University, Wuxi 214122, PR China; National Engineering Research Center for Cereal Fermentation and Food Biomanufacturing, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, PR China.
International journal of biological macromolecules
|May 17, 2025
概括
研究人员设计了Pichia pastoris以高效地生产重组人体原3型 (hlCOLIII),实现了高产量. 这种优化的生产方法支持生物医学材料中的原蛋白可扩展的工业应用.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物化学 生物化学
- 材料科学 材料科学 材料科学
背景情况:
- 原蛋白是一种重要的结构蛋白,具有广泛的工业应用.
- 目前的重组原蛋白生产方法,特别是Pichia pastoris,有机会提高产量.
- 工程Pichia pastoris为可扩展的生物制造提供了一个有前途的平台.
研究的目的:
- 为了提高复合人类III型原α1 (hlCOLIII) 的产量,使用工程Pichia pastoris系统.
- 优化基因表达和蛋白质分泌,以有效生产原蛋白.
- 评估产生的复合原蛋白的生物活性和潜在应用.
主要方法:
- 在Pichia pastoris.中增加了hlCOLIII基因的拷贝数.
- 分子伴侣的共同表达,以减轻内质网膜压力.
- 通过AOX1促进体优化转录和翻译效率.
- 发酵规模扩大到5升发酵器.
主要成果:
- 在5L发酵器中获得10.3g/L的高产量.
- 通过克服ER压力,证明成功分泌hCOLIII.
- 甲基显示出显著的抗氧化能力.
- 在包括细胞增殖,迁移和粘附在内的生物活性测定中取得了积极结果.
结论:
- 开发了一种高效的Pichia pastoris菌株,用于可扩展的重组原蛋白生产.
- 建立了用于工业规模制造重组原蛋白的基础.
- 由于其生物活性,强调了hlCOLIII在先进生物医学材料中的潜力.
