相关实验视频
Updated: May 20, 2025
09:11
Assays for Validating Histone Acetyltransferase Inhibitors
Published on: August 6, 2020
6.5K
TR-FRET测定用于分析HDAC10抑制剂和PROTACs
Kim Remans1, Peter Sehr2, Raphael R Steimbach3
1European Molecular Biology Laboratory (EMBL), Protein Expression and Purification Core Facility, Heidelberg, Germany.
Methods in enzymology
|May 17, 2025
概括
开发了一种新的TR-FRET试验,用于测量10 (HDAC10) 基因素脱乙酶的结合. 这种方法量化了在没有酶基质周转的情况下的研究分子相互作用,有助于药物发现.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 药物发现 药物发现 药物发现
- 酶学 是一种酶学.
背景情况:
- 定量生物化学表征对于药物发现至关重要.
- 基因组脱乙酶 (HDACs) 是治疗点,HDAC10 独特地使用小分子聚氨酸作为基质.
- 对于HDACs的传统测定依赖于基质,这些基质不适合HDAC10.
研究的目的:
- 为定量测量HDAC10结合,调整一个TR-FRET联体位移试验.
- 开发一种不需要酶活性的方法来表征HDAC10抑制剂.
- 为了能够选针对HDAC10.10的研究分子.
主要方法:
- 制备一个小分子染料结合剂 (标记剂).
- 生产一个TwinStrep-GST-HDAC10融合蛋白.
- 使用Eu3+标记的Strep-TactinXT®进行检测.
- 执行TR-FRET带位移测定用于剂量反应测量.
主要成果:
- 一个TR-FRET试验成功适应HDAC10.0的试验.
- 对HDAC10结合分子的剂量反应测量的演示.
- 为研究性化合物生成IC50值.
结论:
- 开发的TR-FRET试验提供了一种可靠的方法来量化HDAC10结合.
- 这种测试规避了酶循环的需要,为HDAC10抑制剂查提供了多功能工具.
- 该方法促进了针对HDAC10.0的潜在治疗剂的生物化学表征.
