在各种临床样本中开发和验证基于纳米板的RT-dPCR试验,用于检测狗呼吸道冠状病毒
Panida Poonsin1,2, Vorapun Wiwatvisawakorn3, Chutchai Piewbang1,2
1Department of Pathology, Faculty of Veterinary Science, Chulalongkorn University, Bangkok, Thailand.
BMC veterinary research
|May 17, 2025
概括
一种新的数字PCR方法在各种样本中提供高度敏感的犬呼吸道冠状病毒 (CRCoV) 检测. 这种先进的测试改进了传统的PCR,有助于对狗感染性呼吸道疾病进行复杂诊断.
科学领域:
- 兽医病毒学 兽医病毒学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 狗的健康 狗的健康
背景情况:
- 狗呼吸系统冠状病毒 (CRCoV) 是狗感染性呼吸系统疾病综合体 (CIRDC) 的重要原因.
- 现有的CRCoV分子诊断试验有限,影响了准确的检测.
- 检测效率因样品类型而异,如鼻腔,口腔喉和直肠抽样.
研究的目的:
- 开发和验证一种基于纳米板的敏感反转录数字PCR (RT-dPCR) 试验,用于CRCoV尖端基因检测.
- 为了评估不同犬类临床样本类型的测试性能.
- 为了比较RT-dPCR与传统RT-qPCR的灵敏度和特异性.
主要方法:
- 开发一种基于纳米板的逆转录数字PCR (RT-dPCR) 试验,针对CRCoV尖端基因.
- 验证使用来自狗的162个临床拭子样本 (鼻腔,口腔,直肠).
- 与基于探针的逆转录定量PCR (RT-qPCR) 的比较分析.
主要成果:
- 该RT-dPCR测定显示出高的重复性,可重复性和低的检测极限 (1.83副本/μL).
- 通过RT-dPCR检测显示灵敏度增加了100倍,并且与其他常见的呼吸道病毒没有交叉反应.
- 通过RT-dPCR发现的CRCoV阳性率高于RT-qPCR,特别是在直肠拭子中 (53.7%对22.22%).
结论:
- RT-dPCR测定是一种高度敏感的工具,用于检测不同样本类型的低CRCoV病毒载荷.
- RT-dPCR提供了精确的检测,补充了RT-qPCR更广泛的查能力.
- 这种测试推进了CRCoV研究,并改善了对狗呼吸道疾病的临床诊断.
