基于微流体纸张的CRISPR/Cas分析设备用于宫癌的临床查

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子诊断学 分子诊断
• 照顾点检测检测 照顾点检测

背景情况:

• 高风险的人类乳头瘤病毒 (HPV) 感染需要敏感,早期查,特别是在资源有限的环境中.
• 目前的HPV检测方法往往涉及复杂的基于管的测试,不适合在医院使用.
• 基于CRISPR/Cas的生物传感器为敏感的HPV检测提供了希望,但需要集成到用户友好的格式中.

研究的目的:

• 开发一款基于纸张的微流体分析装置 (μPAD),用于综合,灵敏和经济高效的高风险HPV检测.
• 在单个μPAD平台上将复合酶聚合酶放大 (RPA) 与CRISPR/Cas12a生物传感结合起来.
• 为了实现快速的,样本到答案的HPV查在点的护理 (POCT) 场景.

主要方法:

• 为无RPA和CRISPR/Cas12a反应开发具有集成的定制μPAD.
• 利用线性和圆形报告器进行基于光检测HPV E7基因.
• 使用临床宫拭片样本验证了测试性能,并将结果与定量PCR (qPCR) 进行了比较.

主要成果:

• 在μPAD上的RPA-CRISPR/Cas12a系统使用线性报告器实现了对HPV E7基因的敏感检测 (1 pM在1小时内).
• 使用圆形报告器,使用35分钟的测试时间获得了对1 fM的增强灵敏度.
• 与qPCR相比,50个样本的临床验证显示95%的灵敏度和100%的特异性.

结论:

• 开发的μPAD平台为高风险HPV检测提供了灵敏,快速和经济有效的解决方案.
• 这种集成的RPA-CRISPR/Cas12a系统代表了临床诊断的重大进步.
• 该平台对在各种医疗保健环境中早期查和管理HPV感染具有重大前景.