使用复合酶聚合酶放大和CRISPR/Cas12b进行Bactrocera dorsalis (Hendel) 的快速视觉检测测试验
Chenyu Lv1, Fengyue Zhang2, Lili Ren3
1Institute of Medical Artificial Intelligence, Binzhou Medical University, Yantai, 264003, Shandong Province, PR China.
Scientific reports
|May 19, 2025
概括
一种新的视觉检测试验使用复合酶聚合酶放大 (RPA) 和CRISPR/Cas12b快速识别东方果,Bactrocera dorsalis. 这种精确的方法在不到35分钟内就能提供结果,有助于害虫控制和防止入侵.
科学领域:
- 农业昆虫学 农业昆虫学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 东方果 (Bactrocera dorsalis) 是一个重要的隔离害虫,由于发育阶段的形态相似性,鉴定具有挑战.
- 克里斯普尔/Cas12b基因诊断已经成为精确的基因目标识别的强大工具.
研究的目的:
- 开发一种使用重组酶聚合酶放大 (RPA) 和CRISPR/Cas12b进行Bactrocera dorsalis的快速视觉检测试验.
- 为了能够在不同发育阶段准确识别B. dorsalis.
主要方法:
- 开发一种结合RPA和CRISPR/Cas12b的视觉检测试验.
- 在43°C的温度下测试测试的性能,结果可以通过肉眼观察到颜色变化.
- 使用不同度的B. dorsalis DNA和原始DNA样本来评估灵敏度.
主要成果:
- 在RPA-CRISPR/Cas12b系统检测到B.dorsalis在30-35分钟.
- 该试验显示出高灵敏度,检测到低至3.2 pg/μL的DNA.
- 通过使用原始DNA成功识别了B. dorsalis,结果是肉眼可见的.
结论:
- 开发的RPA-CRISPR/Cas12b可视化系统提供了一种快速,准确和可视化解释的方法来检测B.dorsalis.
- 这种诊断方法在边境监测和识别其他害虫方面具有潜在的应用,以防止生物入侵和管理害虫控制.
