标准化流细胞计量方法用于使用TruCountTM珠子在肠道粘膜中绝对计数内皮质淋巴细胞
Corentin Joulain1, Stéphanie Bessoles1, Andrada S Chiron1,2
1Université Paris Cité, CNRS, INSERM, UTCBS, Unité des technologies Chimiques et Biologiques pour la Santé, Paris, France.
Bio-protocol
|May 21, 2025
概括
这项研究引入了一种流细胞计量方法,以准确计数内皮质淋巴细胞 (IELs) 和肠上皮细胞 (IECs),改善疾病研究. 这种技术提高了消化系统疾病研究IEL计数的可靠性.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 胃肠病学 胃肠病学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 皮内淋巴细胞 (IELs) 对于肠道免疫和瘤监测至关重要.
- IEL数量的异常与各种消化系统疾病有关.
- 目前的IEL计数方法 (组织学,显微镜) 容易产生偏差和差异.
研究的目的:
- 开发和验证流细胞测量试验,以精确绝对量化IEL和肠上皮细胞 (IEC).
- 建立一种可靠的方法来确定IEL/IEC比率.
- 克服传统计数技术的局限性,提高IEL研究中的可复制性.
主要方法:
- 结合了标准上皮质隔离技术和BD TruCountTM基于珠子的绝对计数.
- 使用流细胞计量来量化特定的IEL (CD45+CD326/EpCAM-CD103+CD3+) 和IEC (CD45-CD326/EpCAM+) 种群.
- 将该方法应用于C57BL/6小鼠模型.
主要成果:
- 通过流细胞计量成功量化绝对IEL数量和IEL/IEC比率.
- 证明了该试验能够提供可复制和标准化的细胞计数的能力.
- 建立了IEL和IEC评估的定量方法.
结论:
- 使用绝对计数珠的流细胞计提供了一种标准化和可重复的方法来确定IEL和IEC计数和比率.
- 这种测试解决了传统方法的局限性,使得跨研究的比较更可靠.
- 开发的技术对消化系统疾病和粘膜免疫学的研究有价值.
