使用稳定同位素稀释UHPLC-MS/MS测量5种细胞内和细胞外 metionin路径中间体的量化
Lyuye Zhang1, Ziyu Liang2, Weibing Zhang3
1Shanghai Key Laboratory of Functional Materials Chemistry, School of Chemistry & Molecular Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China; State Key Laboratory of Environmental Chemistry and Ecotoxicology, Research Center for Eco-Environmental Sciences, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100085, China.
Journal of chromatography. A
|May 21, 2025
概括
这项研究引入了一种敏感的方法,用于测量细胞内外的甲氨酸代谢中间体在细胞亡过程中. 这种技术揭示了细胞死亡期间甲氨酸代谢的动态变化,有助于癌症和其他疾病的研究.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 氨酸代谢重编程和细胞外释放在亡过程中至关重要.
- 准确量化细胞内和细胞外中间体对于理解这些过程至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一种敏感的方法,用于同时量化关键的甲氨酸代谢中间体.
- 为了研究在亡过程中 metionin代谢的动态变化.
主要方法:
- 开发了一种稳定的同位素稀释UHPLC-MS/MS方法.
- 优化移动相添加剂和稀释策略,以最大限度地减少矩阵效应.
- 验证了在细胞细胞醇和介质中量化l-氨酸 (Met),S-adenosylmethionine (SAM),S-adenosylhomocysteine (SAH),l-homocysteine (Hcy) 和5'-methylthioadenosine (5'-MTA) 的方法.
主要成果:
- 对五种关键中间体实现了高回收率 (>71.6%) 和低检测极限 (LOD).
- 在HL60细胞中,在UV诱导的亡过程中,细胞内和细胞外 metionin代谢物的显著动态变化得到证明.
结论:
- 经过验证的UHPLC-MS/MS方法是研究 metionin代谢的强大工具.
- 提供了关于基础研究和临床应用中甲素代谢的调节和功能的见解.
