微环境条件和血清可用性改变初级人类巨细胞NF-κB炎症反应和功能
Breana Channer1, Marzieh Daniali1, Lexi Sheldon2
1Department of Pharmacology and Physiology, Drexel University College of Medicine, Philadelphia, PA, 19102, USA.
Journal of leukocyte biology
|May 22, 2025
概括
培养基显著影响人类巨细胞的免疫反应. 像DMEM和RPMI这样的标准介质产生了可比的结果,而无血清的选择可以抑制炎症活动并改变细胞形态,影响实验结果.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 巨细胞对先天免疫非常重要,并且在体外广泛用于研究免疫信号.
- 对巨细胞的最佳体外培养方法缺乏共识,这引发了关于培养条件对实验结果的影响的问题.
研究的目的:
- 为了比较不同培养介质组合对初级人类单细胞衍生巨细胞 (hMDM) 中的托尔类受体4 (TLR4) 介导的炎症活性的影响.
- 为了研究培养条件如何影响巨细胞形态,细胞和转录形状.
主要方法:
- 主要的hMDM是在含有或不含胎儿牛血清 (FBS) 的介质中培养的,包括DMEM,RPMI和无巨血清介质 (M-SFM).
- 通过NF-κB激活,细胞因子/化学因子分泌和细胞分析来评估脂多糖 (LPS) 介导的反应.
- 对未受刺激的hMDM进行了形态和转录分析.
主要成果:
- 与DMEM和RPMI相比,M-SFM培养物显示了LPS诱导的NF-κB激活,细胞因子/化学因子分泌和减少细胞分裂的默化.
- 补充FBS增强了细胞因子分泌,但也增加了基线分泌,表明了亲炎症的表型.
- 没有FBS和M-SFM的条件诱导了不同的转录特征,影响细胞周期和脂质平衡途径.
结论:
- DMEM和RPMI介质在hMDM中产生可比的形态和功能结果,但存在微小的差异.
- M-SFM显著改变了巨细胞的炎症反应和形态,导致一种默的炎症表型.
- 试管微环境对人类巨细胞的炎症结果产生了关键的影响,这强调了它在实验设计中的重要性.
