撞击性激酶抑制剂可以抑制Toxoplasma gondii的MAPKL1和CDPK1的发生
Jemma A Montgomery1, P Holland Alday1,2, Ryan Choi3
1Division of Infectious Diseases, Portland VA Medical Center, Portland, Oregon 97239, United States.
撞击激酶抑制剂 (BKIs) 向依赖蛋白激酶1 (TgCDPK1) 和基因激活蛋白激酶类1 (TgMAPKL1) 在Toxoplasma gondii中. 双重向表明药物耐药性的基因障碍很高,有助于治疗开发.
科学领域:
- 寄生虫学的寄生虫学
- 药物发现 药物发现 药物发现
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 撞击激酶抑制剂 (BKIs) 已优化,以向Toxoplasma gondii和Cryptosporidium中的依赖的蛋白激酶1 (TgCDPK1).
- BKI-1748是毒素菌的化合物,但其精确的作用机制需要进一步研究.
- 之前的研究表明,BKIs的潜在非目标效应超出了TgCDPK1.1.
研究的目的:
- 阐明BKI-1748.8.的作用机制.
- 在Toxoplasma gondii中确定BKI的额外点.
- 评估对BKIs耐药性的遗传基础.
主要方法:
- 通过化学突变生成来生成BKI-1748耐药克隆的前置遗传选.
- 全基因组测序以确定抗性克隆中的突变.
- 局部定向的突变发生引入特定突变 (TgMAPKL1 Leu162Gln,TgCDPK1 Gly128Met) 进入野生型菌株.
主要成果:
- 耐药克隆在TgMAPKL1.1.的ATP结合部位中表现出单核酸变化.
- 在TgMAPKL1和TgCDPK1中的特定突变分别赋予了2至6倍和类似的耐药性.
- 在TgMAPKL1和TgCDPK1的组合突变导致抗性显著增加 (高达157倍).
结论:
- 除了TgCDPK1,TgMAPKL1也被确定为BKIs的目标.
- 了解双重向可以提高对BKI治疗开发的作用机制的了解.
- 对于这种类型的化合物,建议对耐药性的基因障碍很高.
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09:52Genetic Manipulation in Δku80 Strains for Functional Genomic Analysis of Toxoplasma gondii
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11:21Forward Genetics Screens Using Macrophages to Identify Toxoplasma gondii Genes Important for Resistance to IFN-γ-Dependent Cell Autonomous Immunity
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