从单个B细胞中开发和鉴定出针对PEDV的猪单克隆抗体
Xuan-Ang Wang1, Hong-Xuan Li1, Lan-Lan Zheng2
1Ministry of Education Key Laboratory for Animal Pathogens and Biosafety, College of Veterinary Medicine, Henan Agricultural University, Zhengdong New District Longzi Lake 15#, Zhengzhou 450046, PR China.
Veterinary immunology and immunopathology
|May 27, 2025
概括
研究人员使用来自猪的单个B细胞开发了针对猪流行性腹病毒 (PEDV) 的新型单克隆抗体 (mAbs). 这些抗体向PEDV核体蛋白,并显示出对这种猪病的诊断和治疗应用的潜力.
科学领域:
- 病毒学 病毒学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 猪流行性腹病毒 (PEDV) 导致小猪的显著死亡率.
- 幽默免疫对于控制PEDV至关重要,但来自猪的单克隆抗体 (mAbs) 尚未得到研究.
- 开发特定的mAbs对于诊断和治疗至关重要.
研究的目的:
- 开发和描述针对猪流行性腹病毒 (PEDV) 的单克隆抗体 (mAbs).
- 为了利用来自猪的抗原特异单个B细胞用于mAb生成.
- 建立PEDV结构分析和抗病毒开发的基础.
主要方法:
- 从猪外周血液单核细胞 (PBMC) 中分离出抗原特异单个B细胞,使用光激活细胞分类 (FACS).
- 猪mAbs的可变区域基因被放大,克隆,并在HEK293F细胞中表达.
- 抗体验证使用间接ELISA,间接免疫光检测 (IFA) 和西式涂抹进行.
主要成果:
- 60个双阳性单个B细胞 (PEDV抗原+和IgG+) 被分类,其中36个向PEDV,24个向PEDVN蛋白.
- 21个mAbs成功表达和净化,20个结合PEDV,19个识别了N蛋白,7个与PEDV HN2021发生反应.
- 西方涂抹鉴定了三种特定于N蛋白的mAbs识别线性表位和16种潜在的识别构造表位.
结论:
- 这项研究成功地产生和表征了针对PEDV的新型猪单克隆抗体,特别是针对N蛋白.
- 开发的mAbs表明了识别线性和构造性表征的特异性和潜力.
- 这些发现为开发PEDV的先进诊断工具和抗病毒策略提供了基础.
