通过针对性工程Citrus sinensis的提升 (+) -Limonene的生产 Limonene合成酶

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 酵素工程是什么? 酶工程是什么
• 代谢工程是代谢工程.

背景情况:

• 烯是一种有价值的单烯,用于调味品,香料和药品.
• 微生物生物合成的氨酸经常受到氨酸合成酶的效率的限制.
• 酶工程提供了一条增强利蒙生产的途径.

研究的目的:

• 为了优化Citrus sinensis烯合成酶 (CsLS) 以增加 (+) -烯产量.
• 研究酶工程对CsLS活性,酶选择性和动力学的影响.
• 开发一种可扩展的生物技术方法,用于高水平的利蒙生产.

主要方法:

• CsLS的位点和突变发生,以创建一个变体库.
• 中等通量选以识别改进的利蒙合成酶变体.
• 生物反应器实验将工程 CsLS 与增强的前体供应 (ispA S80F 突变) 结合起来.

主要成果:

• 鉴定了一种截断的CsLS突变 (tCsLS-Q8K),改善了2.1倍的利蒙产量.
• 对CsLS和前体通路的综合优化产生了4.9g/L的 (+) - 烯位.
• 这是迄今为止报告的最大的烯生产水平.

结论:

• CsLS的酶工程显著提高了 (+) - 烯的产量.
• 路径优化,包括前体的可用性,对于最大限度地提高利蒙标位至关重要.
• 这项工作为工业 (+) - 烯生产提供了一个可扩展的方法,影响了风味和香味部门.