快速有效的协议,用于光学清除小鼠肠道组织,用于增强光成像和3D重建
Joel Johnson George1, Sierra H Ball1, Elena Wang1
1Department of Medicine, Columbia University Irving Medical Center, New York, NY, USA; Department of Genetics & Development, Columbia University Irving Medical Center, New York, NY, USA; Herbert Irving Comprehensive Cancer Center, Columbia University Irving Medical Center, New York, NY, USA; Digestive & Liver Diseases Research Center, Columbia University Irving Medical Center, New York, NY, USA; Columbia Center for Human Development/Center for Stem Cell Therapies, Columbia University Vagelos College of Physicians and Surgeons, New York, NY 10032, USA.
STAR protocols
|May 29, 2025
概括
这项研究介绍了一种用于可视化肠道上皮细胞的3D光学清除协议. 这种方法通过保留组织形态来增强组织学分析,并使高分辨率成像能够沿着密室-维卢斯轴进行.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 历史学 历史学 历史学
- 显微镜的使用方法
背景情况:
- 传统的二维组织学部分限制了复杂的三维组织结构的全面分析,如肠道上皮质.
- 了解cryp-villus形态和细胞组织对于研究肠道生理学和疾病至关重要.
研究的目的:
- 介绍肠道上皮细胞3D可视化的协议.
- 为了优化内源光的光学清除,并保持密室-维卢斯形态.
- 为了能够在整个密室-维卢斯轴上对上皮细胞进行高分辨率成像.
主要方法:
- 肠道组织的光学清除.
- 折射指数匹配技术. 折射指数匹配技术.
- 清除组织的3D成像和重建.
- 使用内源光 (tdTomato) 进行血统追踪.
主要成果:
- 成功实现了肠上皮细胞的3D可视化,并保留了密室-形态.
- 在crypt-villus轴上实现了高分辨率成像.
- 在使用Fgfbp1-CreERT2; Rosa26-td番茄小鼠的谱系追踪研究中证明了实用性.
结论:
- 开发的光学清除协议显著提高了肠道上皮组织的3D组织学分析.
- 这种方法为高分辨率成像和理解肠道密码-维卢斯结构中的细胞动态提供了有价值的工具.
- 该协议适用于各种研究,包括血统追踪和发育生物学.
