在猪肉香肠中定量检测肝炎E病毒的优化方法的验证
Sofia Persson1,2, Ramia Molin3, Ronnie Eriksson3
1European Union Reference Laboratory for Foodborne Viruses, Swedish Food Agency, Dag Hammarskjölds väg 56 A, 752 37, Uppsala, Sweden. sofia.persson@medsci.uu.se.
Food and environmental virology
|June 2, 2025
概括
肝炎E病毒 (HEV) 可以通过未熟的猪肉感染人类. 这项研究优化了在猪肉香肠中检测HEV的定量方法,这对于食品安全监测和风险评估至关重要.
科学领域:
- 食物传播的动物传染病是动物传播的疾病.
- 病毒学 病毒学
- 分析化学是一种分析化学.
背景情况:
- 肝炎E病毒 (HEV) 是一种通过食物传播的新兴动物性病原体,特别是生猪肉或未煮熟的猪肉.
- 准确的检测方法对于评估食品中的HEV风险至关重要.
- 关于目前在食品矩阵中HEV检测方法的性能特征的数据有限.
研究的目的:
- 开发和验证一种优化的定量方法,用于检测猪肉香肠中的HEV.
- 为了比较逆转录定量实时PCR (RT-qPCR) 和逆转录滴滴数字PCR (RT-ddPCR) 的HEV检测性能.
- 评估不同的RNA提取和度协议,以检测猪肉香肠中的HEV.
主要方法:
- 优化了使用三反应剂和1--3-烯酸进行样本处理的定量HEV检测方法.
- 使用异醇沉的缩病毒RNA.
- 使用RT-qPCR和RT-ddPCR验证了该方法,包括根据世卫组织HEV RNA国际标准进行测试.
- 将异醇沉与基于磁性二氧化珠的提取方法进行比较.
主要成果:
- 优化方法在RT-qPCR和RT-ddPCR中实现了95%的检测和定量200副本/g的检测和定量限制.
- 与RT-ddPCR相比,RT-qPCR对该方法没有显著的性能改善.
- 当使用耐受抑制剂的RT-qPCR策略时,异醇沉的效率至少是基于磁性珠的提取效率的两倍.
结论:
- 已经开发出了一种高效且具有良好的特征的方法,用于在猪肉香肠中定量检测HEV.
- 该方法为食品安全风险评估和监测计划提供可靠的数据.
- 异醇沉是一种高效的RNA度技术,用于在猪肉香肠中检测HEV.
