使用HEK293悬浮培养物进行复合膀性口腔炎病毒伪颗粒的可扩展生产

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 病毒学 病毒学
• 生物加工是一种生物加工.

背景情况:

• 再组合囊泡性口腔炎病毒 (rVSV) 伪粒子对于疫苗,瘤病毒疗法和研究至关重要.
• 目前的生产依赖于附着电池,限制了可扩展性和制造效率.
• 复制无能力的rVSV提供了增强的安全性和多功能性.

研究的目的:

• 开发一种高产量,可扩展的悬浮培养工艺,用于复制无能力的rVSV伪粒子.
• 优化生产参数,以提高伪粒子产量和质量.
• 为了证明生物反应器中悬浮过程的可扩展性.

主要方法:

• 使用悬浮适应的人类胚胎脏 (HEK) 293F细胞用于rVSV生产.
• 采用多变量方法来优化生产时间,最大限度地减少抑制因素.
• 将该过程扩大到2L水箱生物反应器.

主要成果:

• 取得的高产量:VSV-G载体为7.4 × 10^9 FFU/mL,SARS-CoV-2尖端蛋白伪粒子为2.4 × 10^6 FFU/mL.
• 与以前的粘附方法相比,分别显示出8倍和50倍的更高生产率.
• 通过抗SARS-CoV-2抗体的中和试验验验证伪粒子质量.

结论:

• 开发的悬浮工艺提供了一个可扩展和有效的方法,用于生产复制无能rVSV伪粒子.
• 这一进步促进了疫苗开发和病毒治疗中的更广泛应用.
• 优化的生产参数和悬浮培养提高了产量,简化了制造.