在ELISA中干扰因素的质疑检测 ангиотензин受体抗体和使用吸附电解交叉匹配 (AXE) 技术的特异性验证

科学领域:

• 移植免疫学 移植免疫学
• 免疫化学 免疫化学
• 诊断试验的发展.

背景情况:

• 精确检测人类白细胞抗原 (HLA) 和非HLA抗体对于管理异种移植成功和预防排斥至关重要.
• 非HLA抗体,包括对抗 ангиотензин II 型 1 型受体 (AT1R) 的抗体,都与移植排斥有关.
• 与酶相关的免疫吸收试验 (ELISA) 是测量AT₁R特异抗体 (AT₁R-Ab) 的关键方法,但存在关于信号干扰的担忧.

研究的目的:

• 为了调查 CellTrend AT₁R-Ab ELISA 试验中观察到的信号消除的原因,当样品被预先用吸附外珠 (AOB) 处理时.
• 用CellTrend ELISA套件评估牛血清白蛋白 (BSA) 对AT₁R-Ab检测的影响.
• 评估CellTrend套件和内部ELISA用于检测活细胞中化AT₁R-Abs的性能.

主要方法:

• 证明了 BSA 在 AOB 缓冲器中的作用,导致 CellTrend AT₁R-Ab ELISA 中的信号抑制.
• 通过吸附交叉匹配和化 (AXE) 技术评估了CellTrend套件和内部AT₁R ELISA.
• 在CellTrend ELISA平台上测试的活细胞中量化了AT₁R-Abs的化效率.

主要成果:

• 牛血清白蛋白 (BSA),即使在10-6稀释时,也被确定为CellTrend AT-R-Ab检测套件中负责信号消除的关键成分.
• 在CellTrend ELISA平台上测试时,吸附交叉匹配和化 (AXE) 技术实现了30%的中位化效率.
• 含有BSA的血清治疗被证明会干扰抗体-抗原捕获接口,导致AT₁R-Ab检测中的信号抑制.

结论:

• 细胞趋势ELISA套件准确检测抗AT₁R抗体,这些抗体与AT₁R的活性形式结合.
• 血清治疗中BSA的存在干扰了测试的抗体-抗原捕获机制,导致信号抑制.
• 了解BSA干扰对于在临床环境中准确解释AT₁R-Ab测试结果至关重要,特别是在移植管理中.