肝炎C病毒E2糖蛋白的糖基工程改善了生物化学特性并增强了免疫性

科学领域:

• * 葡萄糖生物学和疫苗开发
• * 病毒学和免疫学
• * 蛋白质工程是什么

背景情况:

• *有效的型肝炎病毒 (HCV) 疫苗需要针对E1E2糖蛋白的广泛中和抗体 (bnAbs).
• * 葡萄糖含量在HCV疫苗抗原性和免疫性中的作用尚不清楚.
• *重组疫苗通常具有异质的糖化,影响抗体反应和中和.

研究的目的:

• * 调查特定的甘氨酸特征如何影响分泌的HCV E2ectodomain (sE2) 的抗原性和免疫性.
• *利用糖基工程的中国仓鼠卵巢 (geCHO) 细胞以同质的糖基化生产sE2.
• *评估受控糖化对抗体结合,受体相互作用和中和功能的影响.

主要方法:

• *使用糖基工程 (geCHO),标准CHO和HEK293细胞系产生分泌的HCV E2细胞外基 (sE2).
• *对sE2抗原与单克隆抗体 (mAbs) 的结合 afinity 的表征.
• * 用不同的sE2变体对小鼠进行免疫接种,并评估抗体反应和对HCV伪病毒 (HCVpp) 的中和活性.

主要成果:

• * 糖基工程 sE2 抗原显示了适度的,可复制的 mAb 亲和度增加,一个变体失去了 CD81 受体结合.
• *所有免疫组的总抗体反应都相似.
• * 一个geCHO sE2组表现出对同源HCVpp的中和效能增加了7倍,并且在多个基因型中具有更广泛的活性.
• *确定了有益和有害的甘氨酸特征,较小的甘氨酸有时与功效降低相关.

结论:

• * 糖甘含量显著影响HCV E2外域的生物化学特性和抗原性.
• *使用糖基工程细胞进行受控的糖基化可以增强HCV疫苗候选人的免疫性和中和性范围.
• *了解甘氨酸的作用对于设计有效的HCV疫苗产生强大的bnAb反应至关重要.