一个简化和全面的协议,用于生成和人类单细胞衍生的巨细胞的多原子分析

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 巨细胞是重要的免疫细胞,在防御和组织修复方面发挥着不同的作用.
• 人类巨细胞的表型具有高度的可塑性,受到环境线索和激活状态 (M1/M2) 的影响.
• 当前的实验室差异化方案有所不同,阻碍了可复制性和交叉研究比较,特别是在使用冷样本时.

研究的目的:

• 开发一个全面和标准化的协议,以区分人类巨细胞和单细胞.
• 严格描述分化和两极化条件对巨细胞表型的影响.
• 为了能够从随时可用的生物银行外围血液单核细胞 (PBMCs) 中对巨细胞进行系统分析.

主要方法:

• 使用冷的PBMCs开发了一个详细的协议,用于将人类单细胞分化为巨细胞.
• 使用多组学方法特征化差异化巨细胞,包括细胞因子分析和转录组学.
• 通过脱极化实验评估了免疫类型的耐用性,并证明了从附着细胞中对snRNA-seq的核隔离.

主要成果:

• 建立了一种可复制的方法,从冷的PBMC中产生人类巨细胞.
• 详细的表征揭示了各种差异化和两极化刺激对巨细胞状态的影响.
• 证明了刺激后巨细胞表型的稳定性,以及一种用于附着细胞多原子分析的新方法.

结论:

• 开发的协议为人类巨细胞的分化和表征提供了一种简化和全面的程序.
• 这种方法提高了可复制性,并使用生物库样本进行了系统研究,这对于细胞疗法和免疫学研究至关重要.
• 该协议支持先进的多原子分析,包括单核RNA测序,直接来自培养的巨细胞.