结合杂交的酶,构建一个平台细胞工厂,产生黄醇3-O-银酸6''-O-酸盐
Xue-Ning Wang1, Zhen Xu1, Li-Li Hong1
1Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College (State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines, NHC Key Laboratory of Biosynthesis of Natural Products & CAMS Key Laboratory of Enzyme and Biocatalysis of Natural Drugs), Beijing 100050, China.
International journal of biological macromolecules
|June 12, 2025
概括
酶乱交被利用来制造各种各样的黄醇3-O-银酸6'-O-酸盐 (F3Gal-6'As). 工程化大肠杆菌产生了这些化合物,三林6''-O-酸盐的产量高达750.8 mg/L,显示了制剂的潜力.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶学 是一种酶学.
- 代谢工程是代谢工程.
背景情况:
- 酶杂乱性,即识别多个基质的能力,往往被最小化以提高代谢物特异性.
- 黄3-O-银酸6''-O-酸盐 (F3Gal-6''As) 是一种具有生物活性的植物性化合物.
- 利用乱交酶为化合物多样化提供了一种新的方法.
研究的目的:
- 为了设计大肠杆菌以生物合成多样化的F3Gal-6'As使用乱交的酶.
- 优化一种工程菌株,以提高特定F3Gal-6'As.As.的生产.
- 评估酶合成的F3Gal-6'As.As的产量,特性和生物活性.
主要方法:
- 在大肠杆菌中使用四种杂交酶构建合成途径:CsF3Ha,AcFLS-HRB,PhUGT和GAT.
- 通过蛋白质和条件调整,模块化工程和优化大肠杆菌菌株 (MT4).
- 工程菌株 (MT4-D17W) 的摇瓶和生物反应器培养以确定产品产量.
主要成果:
- 一种工程菌株MT4-D17W被开发出来,可以合成多个F3Gal-6'As.
- 在瓶培养中,获得的最大产量为404.4mg/L的trifolin 6''-O-乙酸盐 (T6''A),255.5mg/L的超6''-O-乙酸盐 (H6'A) 和117.1mg/L的myricetin-3-O-(6''-O-乙) - 酸盐 (MGal6'A).
- 在6L反应堆中扩大规模,产生了750.8mg/L的T6'A.
- 合成的F3Gal-6'As显示脂肪溶性增加;T6'A和MGal6'A表现出肝保护活性.
结论:
- 酶杂交可以有效地用于F3Gal-6'As.As.的多样化.
- 工程化大肠杆菌菌株为这些化合物的生物技术生产提供了一个强大的平台.
- 这项研究为F3Gal-6'As. 的大规模制备和潜在的治疗应用奠定了基础.
