来自B16-F10小鼠黑色素瘤细胞中的Ganoderma leucocontextum的新型真菌免疫调节蛋白基因的表征和功能分析
Jiayi Yang1, Mengyuan Jin1, Lida Zhang1
1School of Agriculture and Biology, Engineering Research Center of Therapeutic Antibody (Ministry of Education), Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China.
International journal of molecular sciences
|June 13, 2025
概括
一种来自Ganoderma leucocontextum的新型真菌免疫调节蛋白 (FIP),FIP-gle2,可以抑制黑色素瘤细胞的增殖和黑色素合成. 这种在Pichia pastoris中产生的蛋白质显示出制药和化品应用的潜力.
科学领域:
- 菌类学 菌类学是指菌类学.
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 青藏高原的真菌Ganoderma leucocontextum以多糖和三类物质而闻名.
- 真菌免疫调节蛋白 (FIP) 是具有多种生物活性的生物活性化合物.
- 之前没有任何研究研究过G. leucocontextum的FIP.
研究的目的:
- 探索来自G. leucocontextum的FIP-gle2的生物活性.
- 研究复合FIP-gle2 (rFIP-gle2) 对黑色素瘤细胞增殖和黑色素合成的影响.
- 阐明 rFIP-gle2 作用的潜在分子机制.
主要方法:
- 在Pichia pastoris中克隆和表达FIP-gle2.
- 在实验室测试中使用小鼠黑色素瘤B16-F10细胞.
- 分析细胞增殖,细胞亡,铁酶活性,黑色素含量,基因表达 (RNA-seq) 和蛋白质酸化 (西式涂抹).
主要成果:
- FIP-gle2基因 (333 bp ORF) 编码了一个111氨基酸蛋白 (12.60 kDa,PI 4.48).
- 在P. pastoris.中获得了高产量 (184.18 mg/L) 的rFIP-gle2.
- rFIP-gle2显著抑制了B16-F10细胞的增殖和诱导了剂量依赖的亡.
- rFIP-gle2通过降低MITF,TYR,TRP-1和TRP-2的调节,降低了铁酶活性和黑色素合成.
- RNA-seq和西欧斑点检测显示了MAPK信号通路的参与 (JNK,ERK,p38).
结论:
- 皮奇亚牧草是生产rFIP-gle2.gle的有效宿主.
- rFIP-gle2具有显著的抗黑色素瘤和黑色素合成抑制作用.
- rFIP-gle2通过MAPK信号通路进行作用.
- rFIP-gle2具有用于制药,化品和食品工业应用的潜力.
