在小鼠组织中提取和测量ubiquinone和rhodoquinone的协议
Madison Jerome1, Jessica B Spinelli1
1Program in Molecular Medicine, University of Massachusetts Chan Medical School, Worcester, MA 01605, USA.
STAR protocols
|June 13, 2025
概括
这项研究引入了一种方法,用于在小鼠组织中测量乌比金 (UQ) 和罗多金 (RQ). 该协议涉及净化线粒体并量化UQ和RQ水平,用于电子运输链分析.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 线粒体研究 线粒体研究
背景情况:
- 乌比金 (UQ) 和罗多金 (RQ) 是线粒体电子运输链 (ETC) 中的重要电子载体.
- 准确量化UQ和RQ对于了解细胞呼吸和代谢功能至关重要.
- 现有的方法可能缺乏组织分析的效率或特异性.
研究的目的:
- 开发和介绍一种标准化的协议,用于测量来自小鼠组织的纯化线粒体中的UQ和RQ水平.
- 为进一步研究建立一种可靠的方法来量化这些关键的电子载体.
主要方法:
- 通过微分离离心法从小鼠组织中分离线粒体的隔离.
- 双相提取技术从线粒体样本中分离UQ和RQ.
- 将UQ和RQ水平正常化到线粒体蛋白质含量.
- 高性能液态染色学 (HPLC) 或类似的分析技术用于定量化,重点是UQ-9/RQ-9 (老鼠) 或UQ-10/RQ-10 (人类).
主要成果:
- 从小鼠组织中成功净化线粒体.
- 高效提取和隔离UQ和RQ.
- 建立组织线粒体中UQ和RQ的定量方法.
- 证明该协议可用于分析特定的UQ和RQ同类的适用性.
结论:
- 本协议提供了一种可靠的方法来量化组织线粒体中的UQ和RQ.
- 这种方法有助于研究UQ和RQ在细胞能量代谢和疾病中的作用.
- 该协议可用于分析不同物种相关的不同ubiquinone和rhodoquinone同类药物.
