在Komagataella phaffii中,充电工程蛋白质谷氨酸酶FBPG的活性表达
Shudong Peng1, Yating Long2, Haochi Dai1
1National Engineering Research Center of Wheat and Corn Further Processing, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China; School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China.
International journal of biological macromolecules
|June 13, 2025
概括
我们通过蛋白质工程和在酵母中优化表达来增强蛋白质谷氨酸酶 (FBPG) 活性和产量. 这一突破使FBPG在食品行业的工业应用成为可能.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
- 微生物发酵 微生物发酵
背景情况:
- 来自Flavobacterium的蛋白质谷氨酸酶 (FBPG) 有可能导致植物蛋白质脱化.
- 工业用途受到低特异活性,低效表达和前酶形式的限制.
研究的目的:
- 提高FBPG的特定活动和生产收益率.
- 开发一种有效的系统,用于生产用于工业应用的活跃FBPG.
主要方法:
- 部位定向突变发生,以优化FBPG的活性部位.
- 使用不同的促进剂优化Komagataella phaffii中的表达系统.
- 引入Kex2裂解部位,并优化P1'部位用于活性酶的产生.
- 过度表达Sko1以促进FBPG生产.
主要成果:
- 突变型A223H/R225K的特定活性增加了9.43倍 (15.18单位/毫克).
- 通过PDH促进剂和优化的Kex2裂变部位,可以显著改善活性FBPG产量.
- Sko1过度表达使FBPG产量增加了60%,在7L生物反应器中达到2610U/L.
结论:
- 蛋白质工程和优化的发酵显著提高了FBPG活动和产量.
- 这项研究为FBPG在食品工业中的应用提供了基础.
- 活性FBPG可以在没有额外的酶消化的情况下有效地生产.


