在Komagataella phaffii中以磁性或非磁性加热表达没有甲醇的蛋白质
Ibrahim Dagci1, Seyda Yildiz Arslan1, Kubra Solak2,3
1Department of Molecular Biology and Genetics, Institute of Science and Technology, Atatürk University, Erzurum, Türkiye.
Microbial biotechnology
|June 14, 2025
概括
使用热感应开发了一种新的无甲醇基因表达系统,用于Komagataella phaffii. 该系统利用HSP70促进体,为生产治疗性和食品级蛋白质提供了更安全的替代方案.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 微生物表达系统 微生物表达系统
背景情况:
- 酵母 Komagataella phaffii 是重组蛋白质生产的关键宿主.
- 可诱导甲醇的促进剂被广泛使用,但由于甲醇的毒性而受到限制.
- 对于食品和制药应用,需要一个安全的,不含甲醇的表达系统.
研究的目的:
- 在K. phaffii.中开发和描述一种新的无甲醇异质基因表达系统.
- 为了利用热冲击蛋白70 (HSP70) 促进剂用于热诱导蛋白表达.
- 为了增强表达,使用磁纳米粒子进行有针对性的加热和改善细胞透性.
主要方法:
- 使用HSP70促进体 (PHSP70) 构建一种新的表达等离子体pHSPαA.
- 通过磁性和非磁性加热诱导的青的细胞外表达.
- 用Fe3O4@PEI25 kDa纳米粒子对复合细胞进行固定,用于磁性高温症.
- 在不同的加热条件下,固定细胞与非固定细胞中蛋白质分泌的比较.
主要成果:
- 使用没有甲醇的PHSP70系统,成功地在细胞外表达了阿祖林.
- 非磁性加热显示蛋白质表达的时间依赖性增加.
- 与非固定细胞相比,固定细胞表现出增强的蛋白质分泌能力.
- 磁加热没有显示时间依赖的增加,这表明需要优化.
结论:
- 新型没有甲醇的PHSP70表达系统是K. phaffii. 的一个有前途的替代方案.
- 热感应为生产重组蛋白质提供了一种更安全的方法,特别是用于食品和制药领域.
- 纳米粒子介导的磁加热与细胞固定相结合,显示了增强蛋白质分泌的潜力.
