在Saccharomyces cerevisiae中对5hsCT高效表达的安全评估和优化
Yakun Zhang1, Wenlu Jia1, Wenli Qiu1
1School of Bioscience and Technology, Shandong Second Medical University, 7166 Baotong West Street, Weifang, 261053, Shandong, China.
Biotechnology letters
|June 14, 2025
概括
工业酵母Saccharomyces cerevisiae YS-5hsCT是安全的口服使用,显示没有毒性. 确定了优化的发酵条件,以增强生物质和复合素生产.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 微生物发酵 微生物发酵
- 再组合蛋白质的生产生产.
背景情况:
- 开发口服重组蛋白疗法需要安全高效的生产系统.
- 麦芽是生产重组蛋白质的常见宿主.
- 评估转基因酵母菌株的安全性和优化发酵对于工业应用至关重要.
研究的目的:
- 评估Saccharomyces cerevisiae YS-5hsCT表达人类/鱼化学素 (5hsCT) 的口服安全性.
- 为了优化发酵条件,在工业规模生产口服重组酸.
- 为口服卡尔西托尼的商业化提供科学基础.
主要方法:
- 在S. cerevisiae YS-5hsCT上进行了口服毒性测试 (LD50) 和毒理学评估.
- 分析了血液学和生物化学参数,以评估系统性影响.
- 使用mRNA分析和单因子实验来确定最佳的基因表达和生长条件 (温度,激发,通风,注射剂大小,培养时间).
- 在优化发酵条件下量化了生物质和5hsCT蛋白质产量.
主要成果:
- S. cerevisiae YS-5hsCT显示LD50>10g/kg,所有毒理测试均为阴性.
- 最佳的基因表达发生在96小时,30°C和每分钟225转时.
- 优化的发酵条件 (10%的注射液,72小时,25°C,225转/分钟,7升/分钟的空气) 产生了7.175g/L/d生物质和149.24mg/L/d5hsCT蛋白质.
- 观察到正常的血液学和生物化学参数,表明没有不良影响.
结论:
- 转基因的S. cerevisiae YS-5hsCT是口服安全的,不表现出毒性或变异性.
- 优化的种植参数显著提高了生物质和重组蛋白质产量.
- 这项研究为使用S. cerevisiae YS-5hsCT的口服素的工业生产提供了关键的技术支持.
