在功能化的FN-丝网中进行3D培养,促进成熟的人类初级细胞和干细胞的增殖,分化和表型稳定

科学领域:

• 生物材料科学 生物材料科学
• 组织工程是组织工程.
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 重组功能化丝蛋白 FN-丝支持附着细胞的3D培养.
• 之前的FN-丝网支持多种细胞类型的生长和分化.

研究的目的:

• 开发一种易于使用的方法,用于在96孔板上自由浮动的FN丝网.
• 评估 FN-丝网用于培养人类初级细胞和干细胞.
• 评估 FN-silk 适用于 3D 细胞培养的适用性,重点关注人类介质干细胞 (hMSC) 和肝细胞.

主要方法:

• 在96井板中创建了自由浮动的FN丝网.
• 在FN-丝网中培养出人类介质干细胞 (hMSC) 和初级人类肝细胞.
• 将FN丝网中的hMSC与无支架球体进行了比较,以了解生命力,增殖,缺氧和亡.
• 在3周内评估hMSC分化为脂肪细胞样细胞.
• 在FN-丝网和2D培养中评估了人类初级肝细胞功能和标记物维护.

主要成果:

• 在FN-丝网中的hMSC形成了模仿组织的3D培养,具有细胞-细胞和细胞-矩阵接触.
• 与没有脚手架的球体相比,hMSC在FN丝网中表现出更高的活力,增殖和较低的缺氧/亡.
• FN-silk支持hMSC分化成具有持续活力和改善脂肪生成标志物的脂肪细胞样细胞.
• 主要的人类肝细胞在FN丝网中保持了关键功能和表型标记,与2D培养不同.

结论:

• FN-丝网为3D人类细胞培养提供了宝贵的支架.
• 该方法是用户友好的,用于在标准板中创建自由浮动网络.
• FN-silk 支持细胞增殖,分化,并保持组织特异性的功能.
• 这种系统对特定细胞类型的无支架3D培养和传统2D培养具有优势.