开发一种等离子体参考材料,以提高对牛帕维病毒的定量检测的准确性
Caihang Zhang1,2, Mengke Lv1,2, Yanmin Lin1
1Center for Advanced Measurement of Science, National Institute of Metrology, Beijing, 100029, P. R. China. lianhuadong@126.com.
Analytical methods : advancing methods and applications
|June 20, 2025
概括
开发了一种新的等离子体参考材料 (RM),用于准确检测牛类帕沃病毒 (BPV). 这种RM使用数字PCR (dPCR) 来量化,提高了定量实时PCR (qPCR) 诊断测试的可靠性.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
- 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断
背景情况:
- 定量实时PCR (qPCR) 对于病原体检测至关重要,但依赖于准确的参考材料 (RMs).
- 目前的RM通常缺乏可追溯到国际单位系统 (SI) 的可追溯性,限制了定量准确性和实验室间可比性.
- 检测牛病毒 (BPV) 需要可靠的标准来进行准确的诊断和疾病管理.
研究的目的:
- 开发和验证一个等离子体参考材料,用于定量检测牛帕沃病毒 (BPV) VP1基因.
- 建立一种可追溯和准确的方法来量化BPV等离子体参考材料.
- 在诊断应用中提高BPV量化的准确性和可比性.
主要方法:
- 开发含有BPV VP1基因的等离子体参考材料 (RM).
- 建立和验证一种高精度和特定的数字PCR (dPCR) 试验,用于量化RM.
- 使用经过验证的dPCR方法确定BPV等离子体RM的参考值,包括线性,LOD和LOQ评估.
主要成果:
- 开发的dPCR试验在五个数量级上表现出极好的线性 (R2 > 0.999).
- 检测极限 (LOD) 和量化极限 (LOQ) 分别为9个和30个副本/反应.
- BPV等离子体RM的参考值量化为 (2.21 ± 0.25) × 106副本/μL,扩大不确定性 (k=2).
结论:
- 开发的等离子体RM为定量检测BPV提供了可靠的标准.
- 使用这种SI可追溯的RM可以提高通过qPCR定量化BPV的准确性和可比性.
- 这一进步有助于改善对牛帕沃病毒的诊断应用和疾病监测.
