高灵敏悬浮免疫试验用于多重检测,区分和定量八种黄金葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) 肠毒素 (SEA到SEI)

科学领域:

• 食品科学与技术 食品科学与技术
• 微生物学 微生物学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 葡萄球菌肠毒素 (SE) 是导致食物中毒的主要原因,对公共健康构成重大风险.
• 目前对SE的检测方法,包括基于DNA的方法,在灵敏度,特异性和毒素范围上有局限性,可能缺少与疫情相关的关键毒素.
• 现有的商业分析通常无法在蛋白质水平上检测非向的SE,从而阻碍了准确的风险评估.

研究的目的:

• 开发一种高度灵敏和特定的多重悬浮免疫试验 (SIA) 用于通过SEI同时检测葡萄球菌肠毒素SEA.
• 为了产生高亲和度单克隆抗体 (mAbs),用于精确的SE检测.
• 为了验证SIA在复杂食品矩阵中的表现.

主要方法:

• 产生特定于个体SE的高亲和度单克隆抗体 (mAbs).
• 在三明治ELISA和使用Luminex®技术的多重悬浮免疫试验 (SIA) 中实施mAbs.
• 分析了145个全基因组测序的 *Staphylococcus* spp. 的SE生产情况. 和 *Enterococcus faecalis* 菌株,并在三个食品矩阵中进行验证.

主要成果:

• 开发的mAbs表现出极高的灵敏度,其检测极限在每毫升皮克克拉的范围内.
• 多重SIA精确检测并区分了8个SE在细菌培养中的各种序列变异中,测试精度从86.9%到100%不等.
• SIA在复杂的食品矩阵中展示了高回收率和可靠的性能,使得从最小的样本体积中进行检测.

结论:

• 新的多重SIA,利用特定的mAbs,提供了一个强大的平台,可以同时检测,区分和量化多个SEs.
• 这种测试克服了现有方法的局限性,为蛋白质水平上SE检测提供了更好的灵敏度和特异性.
• 食品安全协会是加强食品安全协议和加强对食品中毒的公共卫生响应能力的宝贵工具.