非古典分泌和翻译优化,以增强酸酶表达Bacillus subtilis中的表达
Junya Yang1,2, Wei Xu1,2, Xiaoyong Liu3
1State Key Laboratory of Food Science and Resources, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China.
Journal of agricultural and food chemistry
|June 25, 2025
概括
通过修改N-终端编码序列和5'未翻译区域来优化食品级Bacillus subtilis的酸盐酶 (PyAly) 生产. 这一策略显著提高了工业应用的酶活性.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 酶工程是什么? 酶工程是什么?
- 微生物发酵 微生物发酵
背景情况:
- 酸酶对于生产用于制药,农业和食品的酸寡糖至关重要.
- 在食品级Bacillus subtilis中高水平的酸酶表达具有重大挑战.
- 来自Paenibacillus sp.的酸盐溶解酶. YN15 (PyAly) 在B. subtilis.中使用一种非经典的分泌途径.
研究的目的:
- 增强细菌细菌中阿尔金酸盐酶 (PyAly) 的转化和分泌.
- 调查N端编码序列 (NCS) 和5'未翻译区域 (5'-UTR) 在PyAly表达中的作用.
- 确定最佳的NCS和5'-UTR组合,以最大限度地提高细胞外PyAly活动.
主要方法:
- 用各种NCS和5'-UTR元素替换PyAly的本源信号和pp43NMK载体的原始5'-UTR.
- 评估不同NCS和5'-UTR组合对PyAly翻译和分泌的影响.
- 测量细胞外PyAly活性和非标蛋白质含量在分泌的部分.
主要成果:
- NCS和5'-UTR元件的UTR4-MLD62配对被证明是PyAly生产的最佳选择.
- 这种组合显著降低了分泌部分的非标蛋白含量.
- 细胞外PyAly活性最高达到171.3U/mL,显示出协同优化效应.
结论:
- 这项研究成功地建立了一个平台,用于微调酸酶翻译和分泌在Bacillus subtilis中的细调.
- 优化的NCS和5'-UTR元件协同增强了PyAly的生产.
- 这种方法对工业规模的酶生产具有重大前景.
