一种多重的LC-MS/MS方法,以揭示由宿主感染引起的炎症和凝血级联的变化

科学领域:

• 蛋白质组学是指蛋白质组学.
• 临床化学 临床化学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 像COVID-19这样的严重呼吸道感染涉及炎症 (细胞因子风暴) 和凝血异常,增加血块的风险.
• 目前用于感染监测的基于抗体的测试 (ELISA) 有其局限性,包括复杂性和交叉反应性.
• 需要先进的分析方法来研究宿主对感染的反应.

研究的目的:

• 开发一种基于质谱 (MS) 的方法,用于分析感染中的宿主反应蛋白.
• 为了建立一个快速的蛋白质消化协议,结合针对性的协同MS,用于临床应用.
• 在COVID-19患者中量化与炎症和凝血相关的蛋白质.

主要方法:

• 采用S-Trap柱体消化技术,快速准备样品,减少处理时间和消除淡化.
• 采用有针对性的双重质谱 (MS) 方法与多重反应监测 (MRM) 离子模式.
• 在三重四极质谱仪上使用多重LC-MRM/MS对约60种参与炎症和凝血途径的蛋白质进行量化.

主要成果:

• 快速消化协议显著减少了样品处理时间.
• 90%的分析蛋白质显示出良好的仪器反应.
• 与对照组相比,在COVID-19患者中,63%的蛋白质表现出显著的失调,突出显示了与感染相关的关键蛋白质变化.

结论:

• 开发的多重LC-MRM/MS方法为临床分析提供了高的特异性和性能.
• 这种方法可以快速准确地量化宿主反应蛋白.
• 该方法支持对感染病原和监测的临床研究.