使用CRISPR/Cas9技术生成Plexin-B1条件淘汰赛小鼠
Haofei Ni1,2, Kevin Kelley3, Ning Xie1
1Division of Spine, Department of Orthopedics, Tongji Hospital, Tongji University School of Medicine, Shanghai, China.
概括
研究人员使用CRISPR/Cas9.1生成了一个有条件的Plexin-B1 (Plxnb1) 鼠标模型. 这种新的Plxnb1-floxed等位基因允许对Plexin-B1在发育和生理学中的功能进行细胞类型特定研究.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 分子生物学分子生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 素是关键的轴突引导受体,参与细胞骨和膜动力学.
- 它们的广泛表达需要细胞类型特定的功能分析工具.
研究的目的:
- 在小鼠中产生Plexin-B1 (Plxnb1) 的条件流动性等位基因.
- 为了使Plxnb1.1.的未来细胞类型特定的功能研究成为可能.
主要方法:
- 使用CRISPR/Cas9技术,插入了Plxnb1基因关键外显子旁边的loxP位点.
- 向试剂通过电穿孔输入单细胞小鼠胚胎.
- 使用PCR和桑格测序进行查和验证.
主要成果:
- 在小鼠中成功生成了一个有条件的Plxnb1-floxed等位基因,成功率约为1.6%.
- Alt-R 修改后的 ssODNs 提高了一个 loxP 站点的定位效率.
- 这种Plxnb1-floxed等位基因是通过生殖线传播的,并使用Cre recombinase有效地切除.
结论:
- 使用CRISPR/Cas9.9创建了一个有条件的Plxnb1-floxed小鼠模型.
- 该模型为研究Plexin-B1在各种生物环境中的特定作用提供了有价值的工具.


