在牛奶样本中检测Staphylococcus Enterotoxin海洋和脂质,使用双重滴滴数字PCR
Xiaoyue Wei1, Wenzhou Wang2, Tong Wang3
1National Key Laboratory for Intelligent Tracking and Forecasting for Infectious Disease, Collaborative Innovation Center for Diagnosis and Treatment of Infectious Diseases, National Institute for Communicable Disease Control and Prevention, Chinese Center for Disease Control and Prevention, Beijing 102206, China.
Journal of food protection
|June 26, 2025
概括
一种新的双重滴滴数字聚合酶连锁反应 (ddPCR) 方法准确量化了牛奶中的葡萄球菌肠毒素基因. 这种敏感的技术允许在牛奶样本中直接和精确检测金黄色葡萄球菌.
科学领域:
- 食品科学与技术 食品科学与技术
- 微生物学 微生物学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 葡萄球菌肠毒素 (SEs) 是导致食物传播疾病的主要原因之一.
- 在牛奶等食物矩阵中准确检测SE基因对于食品安全至关重要.
- 现有的方法可能缺乏可靠量化所需的灵敏度或特异性.
研究的目的:
- 开发和验证一种高度敏感和特定的双重滴滴数字聚合酶链反应 (ddPCR) 试验.
- 在牛奶样本中量化测量葡萄球菌肠毒素基因海和脂.
- 为了能够在牛奶样本中直接检测金黄色葡萄球菌.
主要方法:
- 设计用于海洋和皮脂基因的特定原料和探针.
- 优化双重ddPCR的原料/探针度和回火温度.
- 使用标准曲线与等离子体DNA,纯种植物和增牛奶样本进行验证.
- 确定检测极限 (LOD) 和评估准确性和可重复性.
主要成果:
- 在经过验证的范围中实现了高相关系数 (R2 = 0.99).
- 对于两个肠毒素基因,检测极限 (LOD) 确定为2 × 103 cfu/mL.
- 试验内和试验间的变化系数分别为<10%和<20%,表明可重复性良好.
- 在4-5小时的预缩时间内,可以检测到海和脂,以低度S. aureus.
结论:
- 成功建立了一个强大的双重ddPCR系统,用于在牛奶中定量检测海洋和脂质.
- 该方法表现出高灵敏度和特异性,适合常规食品安全分析.
- 这种测定有助于准确和直接检测牛奶中的金黄色葡萄球菌,增强食品安全协议.
